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经验分享

“第八届全国大学生生命科学竞赛(科学探究类)”获奖项目简介及经验分享-2

发布时间 :2023年09月11日 浏览量 :0

项目名称:基于糖基因集确定三阴性乳腺癌分子标志物B3GNT7及其功能验证

团队成员:朱姿霖、李蜀宇、姚佳琦、刘一佳、毛铃雅

指导教师:吴传芳

获奖等级:国家级一等奖

项目简介:

乳腺癌是女性中最常见的恶性肿瘤,在全球女性癌症中发病率为24.2%,确诊人数位居女性癌症首位。随着医学技术的不断发展,针对乳腺癌的治疗手段也逐渐多样而有效,现代医学基于免疫组化将乳腺癌分为了四种分子亚型,其治疗策略也因分子亚型而异。然而,三阴性乳腺癌(TNBC)由于雌激素受体与孕激素受体表达均为阳性缺除化疗外有效的辅助治疗手段,TNBC的患者预后情况差,五年的存活率仅不到60%。因此,亟需寻找TNBC的针对性靶标以期改善其治疗现状。糖基化是一种广泛的翻译后修饰,其异常与癌症的发生发展相关,糖基化相关基因也在预后评估和治疗靶标方面有重大的潜在应用价值。本项目期望通过糖基化作为切入点去找到TNBC的分子标志物及潜在治疗靶标。

获奖经验:

项目前期,项目组成员们利用生信分析确定了B3GNT7TNBC中差异性高表达,可能作为TNBC的潜在标志物。B3GNT7编码beta-1,3-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶7,具有UDP-糖基转移酶活性,但其在TNBC中的功能尚未阐明。成员们通过RT-qPCR实验再次验证了B3GNT7TNBC的强相关性,并通过shRNA敲低了HCC-1937MDA-MB-231两种TNBC细胞系中B3GNT7的表达量。细胞免疫荧光和凝集素免疫印迹实验结果证明了B3GNT7编码的糖基转移酶活性,通过western blottranswell和克隆形成实验我们进一步证明了B3GNT7的敲低抑制了TNBC的增殖、迁移和侵袭能力。本项目证明了B3GNT7TNBC发展中的重要作用,为之后的研究和TNBC的治疗预后提供了指导性靶标。

本项目组成员们在前期积极联系导师,确定选题,制定切实可行的实验方案,然后根据成员们的课余安排进行分工,确保有充裕的时间来开展实验。在参赛过程中安排专职同学及时在竞赛系统上传每次的实验记录和综述等资料,保证参赛文本资料内容充分详实,文字描述逻辑清晰、具备科学性。

项目组成员们通过这段宝贵的参赛经历不仅学习了许多实验技能和方法,也锻炼了分析和解决问题的能力。在完成目的质粒构建、western blot等实验时,成员们都经历了多次重复才收获理想的结果,也真真切切明白了科学研究从来不是一帆风顺的,而人类共同的难题——癌症的攻克更是前路漫漫。在完成比赛综述、准备答辩问题的过程中,成员们也对TNBC治疗相关领域的最新研究进展更加地了解,认识到自己还需要不断学习、成长,努力在生物科学的研究领域发光发热。

1 技术路线

2 敲低B3GNT7前后细胞克隆形成实验结果